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西安百螢生物科技有限公司 主營:百螢生物圍繞熒光發(fā)光、熒光標記、熒光探針等技術進行產(chǎn)品研發(fā),公司產(chǎn)品廣泛用于核酸蛋白定量、細胞凋亡研究、細胞信號通路研究、細胞及線粒體膜電位檢測、細胞器染色、活體示蹤、抗體標記等科研領域。
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技術文章

百螢-Cell Counting Kit-8 (CCK-8) 細胞增殖與活性檢測試劑盒產(chǎn)品簡介

產(chǎn)品簡介

中文名: 細胞增殖與活性檢測試劑盒

英文名:   CCK-8 Cell Counting Kit-8

產(chǎn)品貨號: TJ35001.TJ35002.TJ35003.TJ35004.TJ35000

供應商:   AAT Bioquest

產(chǎn)品規(guī)格: TJ35001:5ml,TJ35002:10ml,TJ35003:30ml,TJ35004:100ml,TJ35000:1ml

產(chǎn)品參數(shù)

Ex (nm) -

Em (nm)-  

分子量  -  

溶劑  -     

存儲條件在零下15度以下保存, 避免光照

Cell Counting Kit-8(cck-8)細胞增殖與活性檢測試劑盒工作原理

Cell Counting Kit-8 (CCK-8) 細胞增殖與活性檢測試劑盒是百螢生物生產(chǎn)的一種基于 WST-8 的廣泛應用于細胞增殖和細胞毒性的快速高靈敏度檢測試劑盒。其主要成分為水溶性四唑鹽 WST-8 (2-(2-甲氧基-4-硝苯基)-3-(4-硝苯基)-5-(2,4-二磺基苯)-2H-四唑單鈉鹽),WST-8 是一種類似于 MTT 的化合物,在電子耦合試劑存在的情況下,可以被線粒體內(nèi)的一些脫氫酶還原生成橙黃色的水溶性的甲臜(formazan)。WST-8 被細胞內(nèi)脫氫酶生物還原后生成的甲臜能夠直接溶解在培養(yǎng)基中。細胞增殖越多越快,則顏色越深;細胞毒性越大,則顏色越淺;顏色的深淺與細胞的增殖成正比,與細胞毒性成反比。使用酶標儀在450mM波長處測定OD值,間接反映活細胞數(shù)量。對于同樣的細胞,顏色的深淺和細胞數(shù)目呈線性關系。百螢生物是AAT Bioquest的中國代理商,為您提供上等的熒光探針。 


 

CCK-8法

MTT法

MTS法

SRB法

XTT法

WST-1法

溶解性

水溶

難溶

水溶

水溶

水溶

水溶

檢測波長

450nm

490nm

450nm

510nm

450nm

450nm

外觀

液體

固體

液體

液體

固體

液體

是否需要重新溶解

不需要

需要

不需要

需溶于Tris堿

需要

不需要

便捷性

+++

++

+++

+

++

+++

檢測效率

++++

+

++

+

++

++

可重復性

+++

+

++

++

+

++

穩(wěn)定性

+++

+

+

+++

+

++

1.MTT法:MTT法又稱MTT比色法,是一種檢測細胞存活和生長的方法。其檢測原理為活細胞線粒體中的琥珀酸脫氫酶能使外源性MTT還原為水不溶性的藍紫色結晶甲臜(Formazan)并沉積在細胞中,而死細胞無此功能。

2.MTS法:以生成有色化合物的顯色反應為基礎,比色分析對顯色反應的基本要**:反應應具有較高的靈敏度和選擇性,反應生成的有色化合物的組成恒定且較穩(wěn)定,它和顯色劑的顏色差別較大。選擇適當?shù)娘@色反應和控制好適宜的反應條件,是比色分析的關鍵。

3.SRB法:磺酰羅丹明B(Sulforhodamine B,SRB)比色法,主要用來檢測細胞增殖情況。SRB是一種粉紅色陰離子染料,易溶于水,在酸性條件下可特異性地與細胞內(nèi)組成蛋白質(zhì)的堿性氨基酸結合;在510 nm左右波長下產(chǎn)生吸收峰,吸光值與細胞量成線性正相關,故可用作細胞數(shù)的定量檢測。

4.XTT法:XTT是一種與MTT類似的四唑氮衍生物,可被活細胞線粒體脫氫酶還原成水溶性的棕色甲肷產(chǎn)物,當XTT與電子偶合劑共同使用時,甲肷的生成量與細胞的增殖程度呈正相關。

5.WST-1法:WST-1是一種類似于MTT的化合物,在電子耦合試劑存在的情況下,可以被線粒體內(nèi)的一些脫氫酶還原生成橙黃色的甲臜(Formazan)。細胞增殖越多越快,則顏色越深;細胞毒性越大,則顏色越淺。WST-1是MTT的一種升級替代產(chǎn)品,和MTT或其它MTT類似產(chǎn)品如XTT、MTS等相比有明顯的優(yōu)點。

Cell Counting Kit-8(cck-8)細胞增殖與活性檢測試劑盒活力計算

活力計算:
細胞活力*(%)=[A(加藥)-A(空白)]/[A(0加藥)-A(空白)] ×100

A(加藥):具有細胞、CCK8溶液和**溶液的孔的吸光度
A(空白):具有培養(yǎng)基和CCK8溶液而沒有細胞的孔的吸光度
A(0加藥):具有細胞、CCK8溶液而沒有**溶液的孔的吸光度
*細胞活力:細胞增殖活力或細胞毒性活力

CCK-8實驗中的關鍵點(供參考):

1. 種板數(shù);

2. 2.種板后細胞的貼壁生長時間;

3. 3.加藥后的孵育時間;

4. 4.CCK-8試劑加入量;

5. 5.CCK-8試劑加入后細胞孵育時間

 

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